Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。
了解ELISA试剂盒实验步骤并不代表实验就会顺利进行下去,还要了解的东西很多,为了降低问题的产生,接下来为大家讲述一下ELISA试剂盒质控标准是如何把控的。
1、严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
2、加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
3、封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。
4、用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
5、合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
6、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
7、显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
8、加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
9、应保证C清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。